Banca de DEFESA: FRANCISCA LOUENNY ALVES CARDOSO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: FRANCISCA LOUENNY ALVES CARDOSO
DATA: 31/03/2023
HORA: 14:30
LOCAL: Núcleo integrado de morfológia e pesquisa com células tronco
TÍTULO: CITOTOXICIDADE E GENOTOXICIDADE DA LAPONITA EM CULTURAS DE CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS
PALAVRAS-CHAVES: Células-tronco mesenquimais; Laponita; Scaffold; Toxicidade; Osteogênese;
PÁGINAS: 70
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

Células-tronco são células indiferenciadas, que constituem ferramenta promissora no campo da
medicina regenerativa, pois possuem capacidade de multiplicação mantendo seu estado
indiferenciado, além da renovação de diversos tecidos, por meio de sua diferenciação celular.
A laponita é uma nanoargila sintética, utilizada em diversas aplicações industriais e possui
características que possibilitam sua utilização na engenharia de tecidos. Recentemente, foram
publicados estudos que comprovam a capacidade da laponita em se diferenciar in vitro, em
osteoblastos, o que a torna um material apropriado para a engenharia de tecidos ósseos. No
entanto, pouco se sabe quanto as reações imunológicas desencadeadas por potenciais
citotóxicos e genotóxicos que essa interação pode proporcionar. Assim, este trabalho foi
desenvolvido com o objetivo de avaliar a toxicidade em nível celular e genômico, da integração
da laponita em culturas de células-tronco adipoderivadas de ratos, sob autorização da Comissão
de Ética no Uso de Animais (CEUA) da UFPI, n. 662/20. A caracterização química da
Laponita® foi realizada por espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier,
análise termogravimétrica, difração de raios X, e micrografias foram realizadas em microscópio
eletrônico de varredura. O material também passou por uma triagem citotóxica por meio do
ensaio de letalidade Artemia salina. O tecido adiposo foi coletado e cultivado a 5% de CO2 a
37°C. Para caracterização celular foram realizados os testes de morfologia e UFC, além da
imunofenotipagem por citometria de fluxo, para os anticorpos CD14, CD45, CD90 e CD105.
Ainda, o ensaio de plasticidade celular, mediante indução para diferenciação osteogênica,
adipogênica e condrogênica, além da avaliação do potencial de diferenciação osteogênica da
Laponita® presente no meio. As células foram cultivadas com a Laponita® em concentrações de
3% e 6% em três tempos distintos para análise de citotoxicidade por MTT. A análise de
genotoxicidade foi conduzida por meio do ensaio cometa para avaliar danos e reparos no DNA
em células individuais. Na caracterização do material obteve-se resultados semelhantes aos
encontrados na literatura, quando se evidencia a estrutura química cristalina e organizada. Nas
análises termogravimétricas, a temperatura de degradação mostrou-se em conformidade com
dados observados em outros estudos. No relativo à toxicidade, a laponita obteve resultados
abaixo da CL50. As células-tronco mostraram-se com morfologia fibroblastóide, e apresentaram
ausência de expressão para os anticorpos CD14 e CD45 e positivos para CD90 e CD105.
Apresentaram capacidade de diferenciar-se em linhagens osteogênica, adipogênica e
condrogênica. Em culturas contendo a laponita, a diferenciação foi potencializada e as células
se diferenciaram em osteoblastos. Quanto à citotoxicidade, as células mostraram evidente, o
aumento da sua viabilidade em todos os tempos analisados. A genotoxicidade entre a interação
da célula com a Laponita® não demonstrou diferenças estatisticamente significativas entre o
índice de dano e os grupos experimentais, porém, quanto a frequência de dano, a Laponita® 6%
difere quando comparada Laponita® 3% em maior tempo de exposição. Com base neste estudo,
conclui-se que a Laponita® representa um biomaterial potencialmente útil para a terapia celular.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 037.799.293-33 - DAYSEANNY DE OLIVEIRA BEZERRA - UFPI
Interno - 128.470.114-04 - MARIA ACELINA MARTINS DE CARVALHO - USP
Externo ao Programa - 1145687 - YULLA KLINGER DE CARVALHO LEITE