Banca de DEFESA: KELVIN JOSEMAR MARQUES LIMA TEIXEIRA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: KELVIN JOSEMAR MARQUES LIMA TEIXEIRA
DATA: 27/08/2020
HORA: 15:00
LOCAL: A defesa será realizada por meio de plataforma de comunicação remota.
TÍTULO: Sequenciamento do genoma do cowpea severe mosaic virus e caracterização de fator molecular possivelmente envolvido com a resistência do feijão-caupi
PALAVRAS-CHAVES: CPSMV; eIF4E; Vigna unguiculata.
PÁGINAS: 53
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
SUBÁREA: Genética Vegetal
RESUMO:

Cowpea severe mosaic virus (CPSMV), causador do mosaico severo do feijão-caupi, é considerado fator limitante para a cultura, influenciando fortemente sua produção. Dependendo da cultivar e da época de infecção, o CPSMV pode reduzir a produção em até 80%. A planta infectada apresenta sintomas de mosaico, bolhosidade foliar e nanismo. Apesar da importância, não se tem conhecimento da sequência completa de isolados brasileiros do CPSMV. Além disso, embora existam cultivares de feijão-caupi resistentes ao CPSMV, não é conhecido o mecanismo de resistência envolvido. O presente trabalho teve como objetivos: (1) Obter o genoma completo de um isolado de CPSMV, e (2) caracterizar o fator de iniciação da tradução eIF4E, de genótipos de feijão-caupi resistentes e suscetíveis ao CPSMV. Plantas de feijão-caupi var. Imponente foram inoculadas via extrato vegetal com o isolado CPSMV THE_18-01. Após 20 dias, o RNA total das plantas sintomáticas, foi extraído com o kit RNeasy Plant Mini e, posteriormente sequenciados por meio da plataforma NovaSeq 6000. Foram obtidas sequências parciais dos RNAs 1 (98,0%) e RNA2 (93,3%) do genoma do isolado CPSMV THE_18-1. As regiões 5’ e 3’ não traduzidas não foram completamente sequenciadas. O RNA1 é composto de 5.577 nucleotídeos (nt), codificando uma poliproteína com 1858 aminoácidos (aa).  O RNA2 apresenta 3.005 nt, codificando uma poliproteína de 972 ou 1001 aa. O isolado CPSMV THE_18-01 apresentou baixa identidade de sequências de nucleotídeos (nt) e aminoácidos (aa) da poliproteína e das proteínas codificadas, quando comparadas com as sequências do isolado CPSMV DG (EUA). A região mais variável entre os dois isolados foi a região codificadora da MP, enquanto VPg foi o cístron que apresentou maior conservação de sequência. Oito plantas de cada genótipo de feijão-caupi (três resistentes e dois suscetíveis) foram inoculadas com CPSMV THE_18-01. Duas plantas de cada genótipo não foram inoculadas (testemunhas). Após 20 dias, o RNA total das folhas foi extraído, amplificadas por RT-PCR com oligonucleotídeos específicos para o CPSMV e eIF4E, e sequenciadas. Por meio do quadro sintomatológico e da presença ou ausência de fragmento amplificado por RT-PCR, os genótipos foram confirmados como resistentes ou suscetíveis. Os padrões polimórficos do gene eIF4E foram averiguados e revelaram duas substituições não sinônimas, diferindo os genótipos resistentes dos suscetíveis. Uma localizou-se na região I (Pro76 ou Ala/Glu76), enquanto a outra fora das regiões I e II (Lys175/ Agr175), ambas as mutações podem estar associadas a resistência do feijão-caupi ao CPSMV. Esses resultados poderão ser utilizados para subsidiar os programas de melhoramento de feijão-caupi na obtenção de genótipos resistentes, seja por transgenia ou melhoramento convencional.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - ELLIOT WATANABE KITAJIMA - USP ESALQ
Externo à Instituição - FRANK MAGNO DA COSTA - UESPI
Presidente - 2058623 - JOSE EVANDO AGUIAR BESERRA JUNIOR