Banca de DEFESA: ANDRESSA REGO DA ROCHA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ANDRESSA REGO DA ROCHA
DATA: 07/08/2015
HORA: 09:00
LOCAL: Núcleo Integrado de Morfologia e Pesquisas com Células-Tronco - NUPCelt
TÍTULO:

Roedor silvestre como fonte de células-tronco: caracterização e multipotencialidade de células mesenquimais  estromais e adiposas de cutias (Dasyprocta prymnolopha)

PALAVRAS-CHAVES:

cutia, Dasyprocta prymnolopha, células-tronco mesenquimais, medula óssea, tecido adiposo

PÁGINAS: 90
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Morfologia
SUBÁREA: Citologia e Biologia Celular
RESUMO:

A utilização da terapia celular representa uma alternativa para o tratamento de diversas doenças degenerativas e crônicas sem resposta aos tratamentos convencionais ou com efeitos limitados aos mesmos. As células-tronco somáticas exibem relevante potencial clonogênico, fácil interação com biomateriais e capacidade de originar tecidos mesodermais e não mesodermais, sem implicações éticas e com mínimos riscos ao paciente. Considerando a busca constante por modelos biológicos que mimetizem a fisiologia e as doenças que acometem humanos, a introdução de novos modelos animais é promissora para a pesquisa médica aplicada. Dentre as qualidades que se destacam em um modelo animal, são relevantes o fácil manejo, alta prolificidade, longevidade e resistência a múltiplos procedimentos. As cutias (Dasyprocta sp.) são animais rústicos, que além dessas características, possuem maior porte que os roedores utilizados em laboratório, e têm sido estudados em seus aspectos morfofisiológicos e como modelo experimental em ensaio pré-clínico. Este estudo teve como objetivo caracterizar células-tronco mesenquimais (CTM) da medula óssea e do tecido adiposo de cutias, visando a utilização de células multipotentes deste roedor silvestre em futuras terapias celulares e pesquisas na área da medicina regenerativa.Foram utilizados nove animais criados no Núcleo de Estudos e Preservação de Animais Silvestres (NEPAS) da Universidade Federal do Piauí – UFPI.As cutias foram anestesiadas para coleta da medula óssea do fêmur e do tecido adiposo subcutâneo da região cervical dorsal. O isolamento das células-tronco mesenquimais da medula óssea (CTMMO) e do tecido adiposo (CTMTA) foi realizadoem cultura celular a partir da fração mononuclear obtida pela separação por gradiente de densidade com Ficoll-Paque, e de fragmentos teciduais resultantes da dissociação física e química com colagenase, respectivamente. Após a expansão dos dois tipos celulares, foram realizados procedimentos de estudo in vitro: Ensaio de Unidade Formadora de Colônia Fibroblastóide; curva de crescimento celular; diferenciação nas linhagens adipogênica, osteogênica e condrogênica; imunofenotipagem pela análise da expressão dos marcadores CD45 e CD90 por citometria de fluxo, acrescido o CD14 para CTMMO; e marcação com nanocristais por diferentes passagens do cultivo. Os resultados demonstraram que as CTM das duas fontes são plástico aderentes, apresentam morfologia fibroblastóide e organizam-se em colônias mesmo quando uma baixa densidade celular inicial é semeada. Foram observadas três fases na curva de crescimento de CTMMO e CTMTA, relacionadas à fase de adaptação, proliferação exponencial e estabilidade da cinética celular.  Quando induzidas à diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica, demonstraram características morfológicas especializadas de cada linhagem celular, alterações semelhantes foram visualizadas em CTMMO que foram criopreservadas quando induzidas à diferenciação adipogênica e osteogênica. A análise imunofenotípica revelou que CTMMO e CTMTA não expressaram marcação de células hematopoéticas e que expressam o CD90 em diferentes níveis. Além disso, estas células incorporam nanocristais fluorescentes e podem ser identificadas através desta marcação por várias gerações celulares. Portanto, as células-tronco mesenquimais destes dois sítios apresentam elevada auto renovação, com as CTMTA apresentando maior atividade proliferativa. A capacidade para diferenciação em três linhagens diferentes confirma a multipotencialidade destas células, que expressam marcação comum às células-tronco mesenquimais obtidas de outras fontes e animais. Ademais, a possibilidade de conservação por criopreservação e identificação por nanocristais fluorescentes favorecem sua futura aplicação em terapia celular. 

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 422578 - MARIA ACELINA MARTINS DE CARVALHO
Interno - 1691866 - NAPOLEAO MARTINS ARGOLO NETO
Externo ao Programa - 2572995 - AIRTON MENDES CONDE JUNIOR
Externo à Instituição - CARLOS EDUARDO AMBRÓSIO - USP
Externo à Instituição - DANIELE DOS SANTOS MARTINS - USP