Este trabalho teve por objetivo avaliar a biodisponibilidade salivar de F após uso de dentifrício fluoretado de alta concentração nos períodos diurno e noturno. Quinze adultos saudáveis participaram deste estudo in vivo, cruzado e duplo cego no qual a concentração de F na saliva foi determinada após escovação com os dentifrícios testados: convencional (1.450 ppm F) e com alta concentração de fluoreto (5.000 ppm F). A saliva foi coletada nos tempos baseline, 0, 5min, 2h, 4h e 8h, durante os períodos diurno e noturno. A concentração salivar de F foi determinada utilizando eletrodo de íon F específico. Foi utilizado o teste de Wilcoxon matched-pairs e teste Kruskall-Wallis com teste de comparação múltipla de Dunn para comparações entre os dentifrícios (1.450 ppm F ou 5.000 ppm F) e períodos (diurno e noturno) com p fixado em 5%. Não houve diferença significativa entre os grupos no baseline (p> 0,05). Imediatamente após a escovação, ambos os dentifrícios aumentaram a concentração de F salivar, sendo a maior concentração atingida no tempo zero; entretanto, o uso do dentifrício 5.000 ppm F manteve a maior concentração salivar de F em todos os momentos avaliados (p <0,05), permanecendo maior até 8 h após a escovação. Houve diferença estatística nos tempos 0, 5min, 2h e 4h em relação ao dentifrício de 1.450 ppm F (p<0,05) e de forma similar, nos tempos 2h, 4h e 8h no dentifrício de 5.000 ppm F no período noturno comparado ao diurno (p<0,05). Assim, pode-se concluir que o dentifrício de alta concentração de flúor aumentou a biodisponibilidade do F salivar durante os períodos diurno e noturno em comparação com o dentifrício convencional.