Banca de QUALIFICAÇÃO: DACYLLA SAMPAIO COSTA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: DACYLLA SAMPAIO COSTA
DATA: 18/12/2020
HORA: 08:30
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO: INVESTIGAÇÃO MOLECULAR DAS ARBOVIROSES CIRCULANTES NO ESTADO DO PIAUÍ
PALAVRAS-CHAVES: Arbovírus; Diagnóstico Molecular; Piauí
PÁGINAS: 89
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Medicina
RESUMO:

As arboviroses são doenças transmitidas aos seres humanos e animais através da picada de vetores artrópodes hematófagos e apresentam similaridade nos sintomas agudos o que dificulta o diagnóstico diferencial. O Chikungunya vírus (CHIKV), além das dores articulares na fase aguda, cerca de 80% dos pacientes evoluem para uma fase crônica debilitante.  O West Nile vírus (WNV) e Oroupouche vírus (OROV) destaca-se pela distribuição no Brasil e sua associação ao estabelecimento de sintomas neurológicos graves.  Considerando a endemicidade e co-circulação dos arbovírus, o diagnóstico sorológico constantemente é dificultado pela similaridade dos sintomas nas fases iniciais da infecção, em conjunto com o desenvolvimento de possíveis reações cruzadas, contribuindo para a subnotificação dos casos, o mais seguro é a realização de testes moleculares, sendo mais sensíveis e específicos. Destaca-se a metodologia de PCRq (Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa), sendo possível a quantiticação de ácidos nucléicos durante o processo de amplificação in vitro. O presente estudo tem como objetivo investigar a dinâmica de circulação das arboviroses e avaliação do perfil clínico de pacientes positivos para CHIKV por métodos moleculares. Neste trabalho foram analisadas amostras de soro de pacientes com sintomatologia clínica para arboviroses coletadas no Pronto Socorro Municipal de Parnaíba-PI (PSM), Hospital Estadual Dirceu Arcoverde (HEDA) e Laboratório Central de Saúde Pública do Piauí (LACEN-PI). O RNA viral foi extraído seguindo protocolo proposto pelo fabricante e encaminhado para conversão em cDNA pela técnica de Transcriptase reversa e posterior amplificação do material presente após padronização da PCR convencional analisando diferentes regiões genômicas para detecção de CHIKV, WNV e OROV.Para detecção dos arbovírus em estudo, protocolos que amplificam regiões distintas dos genes foram padronizados após a realização de testes avaliando diferentes parâmetros de otimização da PCR. Além disso, um par de iniciadores que amplifica a região do segmento S de OROV foi desenhado seguindo todos os parâmetros definidos. Após análise dos testes, todos os protocolos foram padronizados e utilizados para análise molecular. Com a premissa de implementar nova metodologia no laboratório, uma reação de RT-qPCR foi validada para detecção das regiões nsP1 de CHIKV e 3’-UTR de WNV em amostras de soro.  O presente estudo obteve êxito na padronização da técnica de qPCR para a quantificação genômica de CHIKV e WNV, visando ampliar e aprimorar a capacidade de detecção destes vírus. Os pacientes que tiveram detecção positiva foram acompanhados por meio de questionário semiestruturado e seu perfil epidemiológico e clínico foram avaliados. Foram coletadas 363 amostras de soro de pacientes com suspeita de infecção por arbovírus cedidas por laboratórios públicos e privados. Os resultados identificaram 184 pacientes positivos para CHIKV os quais 68 evoluíram para a fase crônica, desses houve predominância do sexo feminino e idade superior a 49 anos, principais sintomas foram rigidez e edemas nas articulações periféricas. Através do estudo pode-se inferir acerca do padrão de circulação dos arbovírus na cidade de Parnaíba-PI, bem como delinear o perfil epidemiológico dos pacientes que evoluíram para a fase crônica de CHIKV.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1640496 - ANNA CAROLINA TOLEDO DA CUNHA PEREIRA
Presidente - 1772764 - GUSTAVO PORTELA FERREIRA
Externo ao Programa - 036.139.216-85 - LUIZ FELIPE LEOMIL COELHO - UFMG